東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的影響
日期:2012-12-28 10:30
摘要:目的觀察東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)記憶障礙模型小鼠的作用效果。方法應(yīng)用氫澳酸東蔑勞堿注射液(scoP)制備小鼠記憶障礙模型,采用避暗實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)和Y型電迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)等方法觀察不同劑量東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)記憶障礙模型小鼠的作用效果。結(jié)果與模型組比較,東當(dāng)歸乙醇提取物中、高濃度組均能改善記憶障礙,作用強(qiáng)度類似于石衫堿甲。結(jié)論東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)SCOP誘導(dǎo)的小鼠記憶障礙具有良好的改善作用。
關(guān)鍵詞:東當(dāng)歸;學(xué)習(xí)記憶;避暗實(shí)驗(yàn);跳臺(tái)實(shí)驗(yàn);水迷宮實(shí)驗(yàn)
中圖分類號(hào):8285.5文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):1008-0805 (2009 ) 08-2043-01
老年癡呆是一種異質(zhì)性疾病,具有特征性神經(jīng)病理和神經(jīng)化學(xué)改變,發(fā)病多為老年前期,但老年期的發(fā)病率更高}' } 0 65歲以上老人中明顯癡呆者約占2% -5%,而85歲以上的老人中幾乎一半患有不同程度的老年癡呆。當(dāng)歸芍藥散是由當(dāng)歸、芍藥、川芍、獲等、白術(shù)、澤瀉組成的傳統(tǒng)中藥處方,國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道其對(duì)老年癡呆癥具有一定的治療效果fz,s7。但是當(dāng)歸單味藥材對(duì)老年性癡呆療效研究報(bào)道不多。因此,本實(shí)驗(yàn)主要研究東當(dāng)歸乙醇提取物對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶的改善作用。
1材料與儀器
1.1動(dòng)物實(shí)驗(yàn)用小鼠,購(gòu)于延邊大學(xué)藥學(xué)院動(dòng)物科,體質(zhì)量(20士2)g。
1.2試藥與儀器東當(dāng)歸,氫嗅酸東蓑若堿注射液(SCOP)(上海禾豐制藥有限公司),石杉?jí)A甲(河南竹林眾生制藥股份有限公司),無(wú)水乙醇為分析純,蒸餾水。YLS一3T型跳臺(tái)記錄儀(山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站),RE一52C旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海申生科技有限公司),方型水迷宮儀(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所),Y型電迷宮儀(中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥物研究所)。
2方法
2. 1東當(dāng)歸乙醉提取物的制備東當(dāng)歸粉碎過(guò)20目篩,準(zhǔn)確稱取,加人8倍量80%乙醇加熱回流提取2h,共3次,合并濾液,減壓抽濾,將濾液于水浴上減壓蒸餾至無(wú)醇味,得到當(dāng)歸的乙醇提取物。
2. 2實(shí)驗(yàn)藥物劑量設(shè)置東當(dāng)歸高劑量為500 mg/kg,中劑量為250 m歲kg,低劑量為125 mg/kg,氫澳酸東食若注射液2 mg/kg,石杉?jí)A甲85 },g/kgo
2. 3實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)小鼠學(xué)習(xí)記憶改善作用的研究實(shí)驗(yàn)分別采用避暗實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)、Y型迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為6個(gè)組,每組含8一10只動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)給藥劑量組分為石杉?jí)A甲組(陽(yáng)性組),SCOP組、空白組、東當(dāng)歸乙醇提取物高劑量組(東當(dāng)歸A組)、東當(dāng)歸乙醇提取物中劑量組(東當(dāng)歸B組)、東當(dāng)歸乙醇提取物低劑量組(當(dāng)歸C組),連續(xù)灌胃30 d,期間所有動(dòng)物自由進(jìn)食飲水,小鼠末次給藥后除空白組外,其余各組均注射SCOP,10 min后進(jìn)行各組實(shí)驗(yàn)。
2. 3.1避暗實(shí)驗(yàn)采用被動(dòng)回避性條件反射儀進(jìn)行避暗實(shí)驗(yàn),將小鼠面部背向洞口放入明室,同時(shí)啟動(dòng)記錄裝置,記錄小鼠第1次進(jìn)入暗室的時(shí)間,此為觸電潛伏期,并記錄5 min內(nèi)小鼠進(jìn)人暗室的錯(cuò)誤次數(shù)作為記憶指標(biāo),24 h后重復(fù)測(cè)試。
2.3.2跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)將小鼠放人跳臺(tái)反射箱內(nèi)適應(yīng)3 min,然后通以38 V交流電,小鼠受到電擊后多數(shù)跳上跳臺(tái)逃避電擊。記錄小鼠第1次跳下時(shí)間,此為觸電潛伏期,并記錄5 min內(nèi)小鼠跳下次數(shù),24 h后重復(fù)測(cè)試。
2.3.3水迷官實(shí)驗(yàn)造模后10 min進(jìn)行水迷宮訓(xùn)練。第1次訓(xùn)練將小鼠放在安全臺(tái)附近G4處,讓其自行游上終點(diǎn)兩次,第2次訓(xùn)練將小鼠放在中部G2,G3處,然后第3次訓(xùn)練時(shí)讓小鼠游全程。設(shè)定時(shí)間為2 min,超過(guò)2 min不能游出者按2 min計(jì)。記錄小鼠自迷宮起點(diǎn)游至安全臺(tái)所需時(shí)間和途中進(jìn)人盲端的錯(cuò)誤次數(shù),連續(xù)測(cè)試4 do
2.3.4 Y型迷宮穿梭實(shí)驗(yàn)測(cè)試前將小鼠放置起步區(qū)的反射臂中,不通電,讓小鼠在三臂中進(jìn)行探索,約2一3 min待其穩(wěn)定后將小鼠抓至起步區(qū),燈亮后2s時(shí),給予電刺激,直至小鼠最終逃到安全區(qū)后30 s,熄燈,作為一次測(cè)驗(yàn)。在24 h后檢測(cè)小鼠10次訓(xùn)練中的正確次數(shù)。
2. 4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法應(yīng)用SPSS 13. 0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以x士;表示,采用t檢驗(yàn),以尸<0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
3結(jié)果
3.1避暗實(shí)驗(yàn)測(cè)試結(jié)果各組小鼠避暗實(shí)驗(yàn)潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)比較見(jiàn)表1。
4討論
東當(dāng)歸是傘形科植物,化學(xué)成分主要含揮發(fā)油、有機(jī)酸、氨基酸、維生素等多種物質(zhì),阿魏酸鈉也是當(dāng)歸中有效單體成分,具有抗氧化、抗自由基、抗炎等藥理作用,有研究表明阿魏酸鈉能對(duì)抗A(3引起的小鼠學(xué)習(xí)記憶損傷,改善小鼠的學(xué)習(xí)記憶功能川。
本研究通過(guò)進(jìn)行避暗實(shí)驗(yàn)、跳臺(tái)實(shí)驗(yàn)、水迷宮實(shí)驗(yàn)、Y型電迷宮穿梭實(shí)驗(yàn),均得出較相一致的結(jié)論,即在末次造模后,模型組與空白組比較,模型組成績(jī)明顯差于空白組,表明造模建立成功;東當(dāng)歸低濃度組與模型組比較無(wú)顯著性差異;東當(dāng)歸中、高濃度組與模型組比較,成績(jī)明顯優(yōu)于模型組。其中,中濃度組效果更加明顯;東當(dāng)歸中、高濃度組都與石杉?jí)A甲組比較無(wú)顯著性差異。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明東當(dāng)歸乙醇提取物中、高濃度組對(duì)記憶障礙小鼠有良好的改善作用,其作用強(qiáng)度類似于石杉?jí)A甲,為開(kāi)發(fā)臨床治療老年癡呆癥藥物提供理論依據(jù),具有一定的研究?jī)r(jià)值。